紫外分光光度计实验原理 紫外分光光度分析法,是依据物质分子或离子团对紫外的特征吸收而建立起来的分析方法,可进行定性、定量分析和结构分析。 一定结构的分子只吸收一定能量的辐射。处于基态的分子受光能激发,它可以吸收特征波长的能量,跃迁到较高的能级(激发态),产生吸收光谱。吸收的能量越多,跃迁的能级越高,波长越短。据此就可以根据吸收光谱的形状,特别是吸收峰的波长位置对物质进行定性分析。 利用蛋白质因含有酪氨酸,色氨酸(有苯环共轭双键)的特点,在280nm处有一吸收峰,光吸收值与其蛋白浓度成正比。光吸收值为1.0的蛋白质溶液,估算它的浓度为1mg/ml。测定范围是0.1~1.0mg/ml.
紫外分光光度计技术指标:
紫外分光光度计波长范围 200-1000nm 波长准确度 ±1nm 波长重复性 0.5nm 紫外分光光度计透射比准确度 ±0.5%τ(T) 透射比重复性 0.3%τ(T) 杂光 (220nm处NaI)≤0.6%τ(T) 稳定性 亮电流:≤0.5%τ(T)/5min 暗电流:≤0.2%τ(T)/5min 透射比范围 0.0%τ(T)-110%τ(T) 吸光度范围 -0.041-1.999 浓度显示范围 0.000-9999 T-A转换精度 0.4%τ(T) 光谱带宽 2nm |